标题 紫外分光光度法 附录序号 附录Ⅴ 内容全文 A.紫外分光光度法
1.仪器的校正和检定
由于温度变化对机械部分的影响,仪器的波长经常会略有变动,因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外,还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83、 253.65、 275.28、296.73、313.16、334.15、365.02、404.66、435.83、546.07与576.96nm,或用仪器中氘灯的486.02与656.10nm谱线进行校正,钬玻璃在279.4、287.5、333.7、360.9、418.5、460.0、484.5、536.2与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用,但因来源不同会有微小的差别,使用时应注意。
吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml,按下表规定的波长处测定并计算其吸收系数。 规定的吸收系数如下表,相对偏差可在±1%以内。
─────────┬─────┬─────┬─────┬────── 波 长 (nm) │ 235(最小)│ 257(最大)│ 313(最小)│ 350(最大) ─────────┼─────┼─────┼─────┼────── 吸收系数E1% 1cm │ 124.5 │ 144.0 │ 48.62 │ 106.6 ─────────┴─────┴─────┴─────┴──────杂散光的检查可按下表的试剂和浓度,配制成水溶液,置1cm石英吸收池中,在下表规定的波长处测定透光率,应符合表中的规定。
───────┬───────┬────────┬─────── 试 剂 │ 浓度% (g/ml)│ 测定用波长(nm) │ 透光率 (%) ───────┼───────┼────────┼─────── 碘 化 钠│ 1.00 │ 220 │ <0.8 亚 硝 酸 钠 │ 5.00 │ 380 │ <0.8 ───────┴───────┴────────┴─────────