维生素A测定法
健康九九网 www.health99.org 更新时间:2006-8-28 17:45:24
标题 维生素A测定法 附录序号 附录Ⅶ 内容全文 J. 维生素A测定法
本法是用分光光度法测定维生素A在特定波长处的吸收度来计算其含量,以单位表 示,每单位相当于全反式维生素A醋酸酯0.344μg或全反式维生素A醇0.300μg。
由于维生素A制剂中含有稀释用油和维生素A原料药中混有其他杂质,所测得的吸收度不是维生素A独有的吸收。在以下规定的条件下,非维生素A物质的无关吸收所引入的误差可以用校正公式校正,以便得到正确结果。
校正公式系采用三点法,除其中一点是在吸收峰波长处测得外,其他两点分别在吸收峰两侧的波长处测定,因此仪器波长若不够准确时,即会有较大误差,故在测定前,应校正仪器波长。
测定应在半暗室中尽速进行。
合成维生素A和天然鱼肝油中的维生素A是酯式维生素A。如供试品中干扰测定的杂质较少,能符合下列第一法测定的规定时,可直接用溶剂溶解供试品后测定;否则应按第二法,经皂化提取,除去干扰后测定。
第一法
取供试品适量,精密称定,加环己烷溶解并定量稀释制成每1ml中含9~15单位的溶液,照分光光度法(附录Ⅳ A),测定其吸收峰的波长,并在下列各波长处测定吸收度,计算各吸收度与波长328nm处吸收度的比值和波长328nm处的E1% 1cm值。
波长, nm 吸收度比值 波长, nm 吸收度比值
300 0.555 340 0.811
316 0.907 360 0.299
328 1.000
如果吸收峰波长在326~329nm之间,且所测得各波长吸收度比值不超过上表中规定的±0.02,可用下式计算含量:
每1g供试品中含有的维生素A的单位=E1% 1cm(328nm)×1900
如果吸收峰波长在326~329nm之间,但所测得的各波长吸收度比值超过表中规定值的±0.02,应按下式求出校正后的吸收度,然后再计算含量。