RT-PCR在SARS动物模型鉴定及疫苗评价中的应用

张扬清 涂新明 朱 华 鲍琳琳 高 虹 张 2005-12-13 13:06:09 中华中西医杂志 2003年10月第4卷第19期

 【摘要】 目的 建立RT-PCR方法，用于鉴定SARS感染性动物模型是否成功建立，并对SARS灭活疫苗的效果进行评估。方法 SARS感染动物模型组选用3周岁的健康SPF级恒河猴，经鼻吸入Sino1SARS毒株。病毒攻击后的第7天将动物处死。评价疫苗组选用3周岁的健康SPF级恒河猴，选择Sino3SARS灭活疫苗（20030904批号）肌肉注射，免疫2次。免疫后经鼻滴入Sino1SARS毒株，病毒攻击后的第7天将动物处死。自病毒攻击后的第1天起每日连续采集动物咽拭子标本，病毒攻击后的第3天、第5天、第7天采集血浆标本 ^［1］ 。将标本进行病毒分离及RT-PCR检测。结果 模型组动物及注射对照疫苗组动物病毒攻击后第1～7天咽拭子标本经RT-PCR检测均为阳性。注射疫苗组动物仅在病毒攻击后第1天咽拭子标本RT-PCR检测呈阳性。模型组动物血浆标本经RT-PCR检测呈现阳性，疫苗组动物血浆标本经RT-PCR检测均为阴性。病毒分离结果显示在模型动物及注射对照疫苗组动物咽拭子标本中分离到病毒，未在疫苗组动物的咽拭子标本分离到病毒。血浆标本中均未分离到病毒。结论 与病毒分离相比，RT-PCR方法具有快速、简便、特异性强等优点，便于推广使用，可作为模型鉴定、疫苗评估及药物筛选的重要手段。

关键词 SARS实验感染动物模型 RT-PCR nesting PCR

Application of RT-PCR on identifying and evaluating

of SARS animal model and vaccine

Zhang Yangqing，Tu Xinming，Zhu Hua，et al.

Institute of Laboratory Animal Science，Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing100021.

Key words SARS corona virus infected animal model RT-PCR nesting Real-time PCR

1 材料与方法