以牛胶原为基料制备胶原膜并构建人工真皮的研究

刘 杰 王德文 张 燕 崔雪梅 谷庆阳 赵梅兰 2005-12-13 13:07:13 中华中西医杂志 2003年9月第4卷第18期

 【摘要】 目的 在牛胶原膜中植入幼儿包皮成纤维细胞，构建人工真皮替代物，以研究细胞的生长、分化、增生及真表皮间的相互作用，为研制大面积创面覆盖物———复合皮奠定基础。方法 （1）酶消化法培养幼儿成纤维细胞;（2）制备胶原膜，接种成纤维细胞后于不同时间观察细胞的形态变化;（3）细胞计数;（4）H.E染色;（5）扫描电镜观测胶原凝胶的表面是否有成纤维细胞附着;（6）透射电镜观察胶原膜内部成纤维细胞形态及结构特点;（7）三联染色观察人工真皮中胶原纤维、弹力纤维及网状纤维的分布。结果 （1）利用胶原膜构建的人工真皮形成后质地与颜色近似真皮组织，有一定的弹性，可出现较明显的细胞增殖，未见人工真皮收缩现象。（2）细胞计数法所得生长曲线表明植入人工胶原膜中的细胞具有典型的细胞增殖现象。（3）H.E染色可见胶原呈较均一的淡红色网状分布，成纤维细胞分布于胶原膜内部和表面。（4）扫描电镜下可见胶原膜表面有梭形的成纤维细胞出现，且成纤维细胞紧密贴附于胶原膜上。（5）透射电镜下见成纤维细胞功能活跃。（6）三联染色显示人工真皮中存在胶原纤维及成纤维细胞新合成的弹力纤维。结论 成纤维细胞在胶原膜中有着活跃的生物学特性，以胶原膜为支架构建的人工真皮具有同正常真皮相似的结构与功能。

关键词 成纤维细胞 胶原膜 皮肤组织工程

Study on how to make the artificial dermis

by bovine collagen membrane

Liu Jie，Wang Dewen，Zhang Yan，et al.

Institute of Radiation Medicine，Academy of Military Medical Sciences，Beijing100850.

Key words fibroblast collagen membrane tissue engineering of skin

Ⅰ型胶原主要分布在皮肤、肌腱、血管壁等组织中，它能促进皮肤上皮细胞的增殖和分化，在胶原刺激下，成纤维细胞生长迅速，使皮肤损伤能较快地修复，因此，Ⅰ型胶原是促进创伤愈合的良好材料。