存活素基因表达在丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡中的作用

赵长林 石兴敏 徐惠绵 周艳丽 田 兵 刘佳 李宏 2005-12-13 13:08:52 中华中西医杂志 2004年6月第5卷第11期

【摘要】 目的 存活素基因异常表达可抑制半胱氨酸蛋白酶32（Caspase-3）介导的细胞凋亡。已往的研究发现丝裂霉素C（Mitomycin C，MMC）对Caspase-3的活化在诱导膀胱癌细胞凋亡中有重要作用，但不同的膀胱癌细胞系对MMC诱导凋亡的敏感性存在明显差异，这是否与存活素基因异常表达有关尚不清楚。针对存活素基因表达对MMC诱导膀胱癌细胞凋亡的影响进行研究，旨在探讨其作用。方法 在培养的膀胱癌细胞系EJ、BIU87中加入MMC（0.1mg/ml），于不同的时间点（12、24、36、48h），采用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记法（TUNEL）检测细胞凋亡、免疫细胞化染色检测Caspase-3蛋白表达;采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对存活素基因表达进行检测。结果 在12、24、36、48h4个时间点EJ细胞的凋亡指数分别为（38.4±1.1）%、（60.9±1.3）%、（63.7±2.1）%、（67.4±0.8）%，Caspase-3蛋白表达分别为（35.6±4.17）%、（57.32±4.83）%、（61.49±5.48）%、（63.56±5.05）%，均明显高于BIU87细胞（9.8±2.3）%、（36.3±1.90）%、（50.9±3.20）%、（52.4±3.80）%、（9.31±1.76）%、（32.93±3.91）%、（34.69±4.69）%、（35.35±5.28）%;而EJ细胞中存活素基因表达则明显低于BIU87细胞。结论 存活素基因表达水平对膀胱癌细胞的存活和化疗抗性的产生有重要影响，阻断其表达可能是膀胱瘤治疗的新靶点。

关键词 膀胱肿瘤 癌 存活素 细胞凋亡

Effect of survivin expression on mitomycin-C induced apoptosis

of bladder caricinoma cells

Zhao Changlin，Shi Xingmin，Xu Huimian，et al.

Department of Urology，Affiliated Hospital of Medical college of Dalian Univ

ersity，Dalian116021.

1 材料与方法

1.1 细胞培养 人膀胱癌细胞系EJ、BIU87由北京大学泌尿外科研究所提供，在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中，37℃、5%CO 2 条件下培养。