前列腺炎的支原体与细菌分离培养结果分析
王丽 张萍 2005-12-13 13:09:28 中华中西医杂志 2003年3月第4卷第5期
对92份前列腺液进行了细菌与支原体分离培养,以探讨前列腺炎患者的细菌谱分布及支原体的感染情况。
1 材料与方法
1.1 病人来源 92例患者病程均在2周以上,临床症状明显,前列腺液常规检查WBC>10个/HP,平均年龄38.4岁,近期未服用抗生素。
1.2 标本采集 前列腺液收集参照Meares-Stanmey分段法(1968),嘱患者清洗外阴,排尿后作前列腺按摩。第1滴前列腺液用于常规检查,第二、三滴分别用于支原体和细菌培养。
1.3 支原体培养基 解脲支原体和人型支原体的液体及固体培养基均由上海第二医科大学提供。
1.4 希派(Shepard)试剂 8g/L氯化锰(MnCl 2 ·4H 2 O)溶液和10g/L分析纯的尿素水溶液,临用时1:1混合,放置在4℃冰箱备用。
1.5 支原体分离 培养物于35℃孵育,分别24、48、72h观察结果,支原体在液体培养基快速生长,可以分解其中的尿素或精氨酸,因培养基的pH值改变而使其中的指示剂变色。若颜色有改变的液体培养基则用0.45μm的微孔滤器过滤之后再接种另一液体培养基中,若再次发生颜色改变,则转种于固体培养基,35℃微氧环境48~72h用低倍镜和目镜测微器观察,可见圆形凸起由细小颗粒聚集而形成典型菌落。中心密度较高,加1滴Shepard试剂于典型菌落上,解脲支原体呈棕色,其它菌落不显色。
1.6 细菌分离及体外药敏试验 鉴定程序按《全国临床检验操作规程》进行,所用的血琼脂、巧克力琼脂、水解酪蛋白胨琼脂,各种生化反应试剂、生化鉴定微量管及药敏纸片,均系市售试剂盒。
2 结果
2.1 支原体分离培养鉴定结果 92份标本分离出解脲支原体21株(22.83%,21/92),人型支原体15株(16.3%。15/92),其中4例为解脲支原体与人型支原体共同阳性,占4.35%(4/92)。